發(fā)布時間: 2023-08-21 13:48:47
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食用油中脂肪酸分析方法
一、目的與要求油脂是食品加工中重要的原料和輔料,也是食品的重要組分和營養(yǎng)成分。必需脂肪酸是維持人體生理活動的必要條件,人體所必需的脂肪酸一般取自食品用油,即食用油脂。氣相色譜法測定油脂脂肪酸組分是現(xiàn)在zui常用的方法,也是一些相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)(如:GB/T17377
)規(guī)定應(yīng)用的檢測方法。甲酯化是分析動植物油脂脂肪酸成分的常用的前處理方法,也是常用的標(biāo)準(zhǔn)方法(GB/T 17376-1998
)。本實驗要求了解氣相色譜法測食用油脂肪酸組成的原理,掌握樣品的前處理方法,學(xué)習(xí)食用油脂中脂肪酸組分的色譜分析技術(shù)。二、原理本實驗甲酯化方法采用國標(biāo)--GB/T 17376-1998
,甘油酯皂化后,釋出的脂肪酸在三*氟化硼存在下進(jìn)行酯化,萃取得到脂肪酸甲酯用于氣象色譜分析。
樣品中的脂肪酸(甘油酯)經(jīng)過適當(dāng)?shù)那疤幚恚柞セ┖?,進(jìn)樣,樣品在汽化室被汽化,在一定的溫度下,汽化的樣品隨載氣通過色譜柱,由于樣品中組分與固定相間相互用的強弱不同而被逐一分離,分離后的組分,到達(dá)檢測器(detceter
)時經(jīng)檢測口的相應(yīng)處理(如FID
的火焰離子化),產(chǎn)生可檢測的信號。根據(jù)色譜峰的保留時間定性,歸一法確定不同脂肪酸的百分含量。 三、儀器與試劑(一)儀器-北京普瑞
分析儀器有限公司(www.qjjdsb.com)1
.氣相色譜儀:GC-9280
,配氫火焰離子化檢測器(FID
)。2
.恒溫水浴鍋3
.移液管4
.膠頭滴管5
.小圓底燒瓶6
.冷凝管7.
樣品瓶 (二)試劑:.
石油醚、乙*醚、氫氧化鉀、甲醇均為AR級。
四、實驗步驟(一)樣品預(yù)處理
酯化測定:取0.2g
油樣于10ml
容量瓶中,家5.0ml 4:3
石油醚,使其溶解,在加4.0ml 0.5mol/L
氫氧化鉀—
甲醇溶液,振搖1
分鐘,放置8min
后加水1.0ml
,靜止20min
使之分層,取上層液注入色譜儀,保留時間定性,面積歸一化法定量。大豆油測定方法:
(1
)氣相色譜條件①色譜柱:石英彈性毛細(xì)管柱,0.32mm
(內(nèi)徑)×30m
,內(nèi)膜厚度0.5um
。②程序升溫: 150
℃保持3min
,5
℃/min
升溫至220
℃,保持10min
;進(jìn)樣口溫度250
℃;檢測器溫度300
℃。③氣體流速:氮氣:40mL/min
,氫氣:40mL/min
,空氣:450mL/min
,分流比30
﹕1
。④
柱前壓:25kpa
(2
)色譜分析自動進(jìn)樣,吸取0.4-1
μL
試樣液注入氣相色譜儀,記錄色譜峰的保留時間和峰高。利用標(biāo)準(zhǔn)圖譜確定每個色譜峰的性質(zhì)(定性),利用軟件自帶的自動積分方法計算各脂肪酸組分的百分含量。五、鑒別1.
測定常見植物油主要脂肪酸的構(gòu)成比并查閱有關(guān)資料,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理,不同的植物油主要脂肪酸的組成大部分有相同之處,但是主要脂肪酸的含量是不相同的。根據(jù)脂肪酸組成與含量,即可鑒別油品種類。2.
氣相色譜法測定脂肪酸,通常用硫酸—
甲醇法,和AOAC-IUPAC
標(biāo)準(zhǔn)法,我們采用了氫氧化鉀-
甲醇法,經(jīng)試驗3
種方法測定結(jié)果差異無顯著性。