動物源性食品中9 種有機磷農藥殘留量的測定氣相色譜法
有機磷農藥殘留量的測定氣相色譜儀
 
GC-9280型有機磷農藥殘留量的測定氣相色譜儀 適用于火腿和腌制魚干（鲞）中敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲基對硫磷、馬拉硫磷、對硫磷、喹硫磷、殺撲磷、三唑磷農藥殘留量的檢測。
規(guī)范性引用文件
GB 2763 食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量
GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法
原理
試樣經乙腈振蕩提取，以凝膠色譜柱凈化，用配有火焰光度檢測器的氣相色譜儀測定，外標法定量。
試劑和材料
除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，水為符合GB/T 6682中規(guī)定的一級水。
試劑
乙酸乙酯（C4H8O2）：色譜純。
乙腈（C2H3N）：色譜純。
 環(huán)己烷（C6H12）：色譜純。
溶液配制
GPC洗脫液：乙酸乙酯+環(huán)己烷（1+1，體積比）：取100 mL乙酸乙酯，加入100 mL環(huán)己烷，搖勻 備用。
 標準品
 有機磷類標準品：敵敵畏（dichlorvos,CAS：62-73-7），
甲胺磷（methamidophos, CAS： 10265-92-6）,
乙酰甲胺磷（acephate, CAS：30560-19-1）,
甲基對硫磷(parathion methyl, CAS： 298-00-0),
馬拉硫磷(malathion, CAS：121-75-5),
對硫磷(parathion, CAS：56-38-2),
喹硫磷 (quinalphos, CAS：1776-83-6)，
殺撲磷(methidathion, CAS：950-37-8)，
三唑磷(triazophos, CAS： 24017-47-8)，
純度均≥99％。
標準溶液配制
敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲基對硫磷、馬拉硫磷、對硫磷、喹硫磷、殺撲磷、三唑磷標
準儲備溶液：分別稱取適量標準品，分別用丙酮溶解定容至 100 mL，溶液濃度為 100 mg/mL,。臨用前
根據需要用丙酮稀釋至適當濃度,作為混合標準工作液。保存于 4℃冰箱內。
儀器和設備
氣相色譜儀普瑞GC-9280型，配有火焰光度檢測器(磷濾光片 525 nm)。
分析天平：感量 0.01 g 和 0.0001 g。
旋轉蒸發(fā)器 5.4 凝膠凈化成品柱（GPC）：25 mmID x 400 mm;填料:Bio-Beads, S-X3,38 mm-75
mm（在使用前需先做淋洗曲線）。
恒溫振蕩器。
混勻器。
6 試樣制備與保存
從所取全部火腿或腌制魚干樣品中取出有代表性樣品約 500 g，取樣部位按 GB 2763 附錄 A 執(zhí)行,GB 23200.91—2016
用粉碎機粉碎，混合均勻，均分成兩份，分別裝入潔凈容器作為試樣。密封，并標明標記。
在抽樣和制樣的操作過程中，應防止樣品污染或發(fā)生殘留物含量的變化。將試樣于存放于-18°C 冰 箱下保存。
分析步驟
1 提取
稱取 20 g 粉碎的均勻試樣(精確到 0.01 g)置于 100 mL 具塞三角瓶中，加入 50 mL 乙腈，在 30℃ ±2℃振蕩器上，振搖 2 h，過濾，用乙腈少量多次洗滌殘渣，合并濾液，置 40 ℃以下水浴減壓濃縮至 近干。
2 凈化
殘渣用 4.2.1 溶劑定容至 10 mL，混勻 2 min，離心 5 min，3000r/min。取 5.0 mL 上清液過 GPC 柱，流速 5 mL/min,用 4.2.1 溶劑洗脫，棄去前 100 mL 淋洗液，收集 100 mL 至 165 mL 的洗脫液，在 40 ℃以下水浴減壓濃縮至近干，加入 8 mL 乙酸乙酯溶解,定量轉移至 10 mL 離心管中，在 40℃以下水 浴中用平緩氮氣流吹至干，火腿樣品準確加入 1.0 mL 丙酮，水產品（腌制品）準確加入 5.0 mL 丙酮，
混勻，供氣相色譜測定。
測定
 氣相色譜參考條件
a）色譜柱：石英毛細管柱，DB-1701,30 m ×0.53 mm (內徑) ×1.0 μm（膜厚），或相當者；
b）載氣：氮氣（純度大于 99.999%）；載氣流速 10 mL/min；尾吹氣流速：30 mL/min；氫氣流速： 75 mL/min，空氣流速：100 mL/min；
c）柱溫：初始溫度 150°C 保持 2 min,以 8°C/ min 升至 270°C 保持 18 min；
d）進樣口溫度:250°C；
e）檢測器溫度：250°C；
f）進樣方式：不分流進樣；
g）進樣量：2 mL；
h）開閥時間：1.5 min。
色譜測定與確證
根據樣品中被測有機磷農藥的含量，選定峰面積相近的標準工作溶液。標準工作溶液和樣液中各種 有機磷的響應值均應在儀器的線性范圍內。標準工作溶液和樣液等體積穿插進樣測定。
空白實驗
除不加試樣外，均按上述測定步驟進行。
 結果計算和表述
用色譜數據處理機或按下式（
1）計算試樣中有機磷類農藥的含量：
式中：
Xi ——試樣中各有機磷類農藥的殘留含量，單位為毫克每千克，mg/kg；
Ai ——樣液中各有機磷類農藥的峰面積；
V ——樣液最終定容體積，單位為毫升，mL；
Asi ——標準工作液中各有機磷農藥的峰面積；
Csi ——標準工作液中有機磷農藥的濃度，單位為微克每毫升，mg/mL；
m ——最終樣液所代表的試樣量，單位為克，g。
注：計算結果須扣除空白值，測定結果用平行測定的算術平均值表示，保留兩位有效數字。
9 精密度
9.1 在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值與其算術平均值的比值（百分率），應符合
附錄B的要求。
9.2 在再現性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值與其算術平均值的比值（百分率），應符合
附錄C的要求。GB 23200.91—2016
10 定量限和回收率
10.1 定量限
火腿樣品：敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲基對硫磷、馬拉硫磷、對硫磷、喹硫磷、殺撲磷、三
唑磷均為0.01 mg/kg。
腌制魚干（鲞）樣品：敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲基對硫磷、馬拉硫磷、對硫磷、喹硫磷、
殺撲磷、三唑磷均為0.05 mg/kg
10.2 回收率
回收率和精密度的實驗數據（在不同添加濃度范圍內）如下：
火腿樣品：
a）敵敵畏：
添加濃度在0.01 mg/kg、0.02mg/kg、0.1 mg/kg時回收率為74%~106%，精密度6.4%~11.7%。
b）甲胺磷：
添加濃度在0.01 mg/kg、0.02mg/kg、0.1 mg/kg時回收率為74.5%~106%，精密度9.6%~11.1%。
c）乙酰甲胺磷：
添加濃度在0.01 mg/kg、0.02mg/kg、0.1 mg/kg時回收率為74%~106%，精密度10.9%~11.7%。
d）甲基對硫磷：
添加濃度在0.01 mg/kg、0.02mg/kg、0.1 mg/kg時回收率為74%~103%。，精密度8.6%~11.5%
e）馬拉硫磷：
添加濃度在0.01 mg/kg、0.02mg/kg、0.1 mg/kg時回收率為72%~104%，精密度7.4%~10.9%。
f）對硫磷：
添加濃度在0.01 mg/kg、0.02mg/kg、0.1 mg/kg時回收率為71%~105%，精密度6.5%~13.1%。
g）喹硫磷：
添加濃度在0.01 mg/kg、0.02mg/kg、0.1 mg/kg時回收率為78%~105%，精密度8.0%~9.5%。
h）殺撲磷：
添加濃度在0.01 mg/kg、0.02mg/kg、0.1 mg/kg時回收率為79%~105%，精密度7.5%~9.2%。
i）三唑磷：
添加濃度在0.01 mg/kg、0.02mg/kg、0.1 mg/kg時回收率為78%~105%，精密度7.8%~9.5%。
水產品（腌制品）樣品：
a）敵敵畏：
添加濃度在0.05 mg/kg、0.1mg/kg、0.5 mg/kg時回收率為72%~103%，精密度9.8%~11.0%。
b）甲胺磷：
添加濃度在0.05 mg/kg、0.1mg/kg、0.5 mg/kg時回收率為78%~108%，精密度7.0%~9.4%
c）乙酰甲胺磷：
添加濃度在0.05 mg/kg、0.1mg/kg、0.5 mg/kg時回收率為70%~104%，精密度9.0%~9.8%
d）甲基對硫磷：
添加濃度在0.05 mg/kg、0.1mg/kg、0.5 mg/kg時回收率為82%~106%，精密度7.3%~10.1%
e）馬拉硫磷：
添加濃度在0.05 mg/kg、0.1mg/kg、0.5 mg/kg時回收率為78%~104%，精密度8.4%~9.2%
f）對硫磷：
添加濃度在0.05 mg/kg、0.1mg/kg、0.5 mg/kg時回收率為80%~109%，精密度7.2%~11.3%
g）喹硫磷：
添加濃度在0.05 mg/kg、0.1mg/kg、0.5 mg/kg時回收率為74%~104%，精密度9.6%~11.4%
h）殺撲磷：
添加濃度在0.05 mg/kg、0.1mg/kg、0.5 mg/kg時回收率為72%~105%，精密度9.6%~11.2%
i）三唑磷：
添加濃度在0.05 mg/kg、0.1mg/kg、0.5 mg/kg時回收率為79%~105%，精密度7.4%~8.2%
3GB 23200.91—2016
4
標準品色譜圖

圖A.1 9種有機磷標準品的氣相色譜圖
1—— 敵敵畏（2.4 min）
2—— 甲胺磷（3.3 min）
3—— 乙酰甲胺磷（5.9 min）
4—— 甲基對硫磷（10.4 min）
5—— 馬拉硫磷（10.7 min）
6—— 對硫磷（11.3 min）
7—— 喹硫磷（11.7 min）
8—— 殺撲磷（12.6 min）
9—— 三唑磷（14.9 min）